NovoCyte Quanteon 4激光流式細(xì)胞儀是大獲成功的 NovoCyte 流式細(xì)胞儀系列的新一代產(chǎn)品。NovoCyte Quanteon 4激光流式細(xì)胞儀，可以配置多達(dá) 25 個獨立的光電倍增管，滿足各種高要求的樣品 panel。Quanteon 采用專有的光電倍增管技術(shù)，提供出色的靈敏度、穩(wěn)定性及寬達(dá) 7.2 個數(shù)量級的動態(tài)范圍?？梢栽谕粋€視圖中對極弱和強(qiáng)的熒光信號進(jìn)行捕獲并設(shè)門，無需費時費力的反復(fù)調(diào)整 PMT。

在開發(fā)復(fù)雜多色 panel 時，Quanteon 可節(jié)省數(shù)小時的設(shè)置和分析時間。出色的液路系統(tǒng)提供穩(wěn)定、一致的樣品輸送，具有高重現(xiàn)性和極低的 CV。體積法絕對計數(shù)功能無需使用昂貴的微球，節(jié)省您的時間和金錢。

特性

1、全自動清洗和關(guān)機(jī)功能使操作更加簡單

2、使用 NovoSampler Q 實現(xiàn)高效、無人值守的自動化操作

3、靈活的樣品處理，即使對于非常小的樣品體積也能實現(xiàn)有效的混合，此外還兼容常規(guī)的孔板形式、條形碼和實驗室自動化系統(tǒng)的內(nèi)置 API。

4、簡便易用的 NovoExpress 軟件提供自動補償功能、細(xì)胞周期分析模塊、細(xì)胞增殖模塊、熱圖和批處理功能。

性能指標(biāo)

工作原理

高靈敏度的光電檢測器

硅光電倍增管 (SiPM) 是基于硅基底的固態(tài)半導(dǎo)體器件，具備光子能級靈敏度，動態(tài)范圍為 7.2 個數(shù)量級。SiPM 是一款具有光子計數(shù)功能的緊湊檢測器，由設(shè)計緊湊、可同時運行的雪崩光電二極管陣列組成。NovoCyte Quanteon 設(shè)計中的創(chuàng)新光學(xué)器件包含 25 個獨立的 SiPM，可收集并處理來自每個熒光通道的信號。

出色的散射光分辨率，可檢測小顆粒

NovoCyte Quanteon 散射光檢測光學(xué)系統(tǒng)和信號處理電子器件經(jīng)過優(yōu)化，可以分辨粒徑小至 0.1 µm 的顆粒。憑借這種優(yōu)異的分辨率，可輕松識別和分析血小板、細(xì)菌和各種亞微米顆粒。

高重現(xiàn)性和穩(wěn)定性

NovoCyte Penteon 和 NovoCyte Quanteon 的液路系統(tǒng)專為提供高性能而設(shè)計。NovoCyte Penteon 和 NovoCyte Quanteon 擁有其他流式細(xì)胞儀很難實現(xiàn)的液路一致性和穩(wěn)定性。使用蠕動泵的其他儀器通常會受到液路脈動的影響，導(dǎo)致絕對細(xì)胞計數(shù)不一致和不準(zhǔn)確。

應(yīng)用

凋亡分析

細(xì)胞凋亡也稱為細(xì)胞程序性死亡，是細(xì)胞調(diào)控自身死亡的過程，通過激活特定通路使細(xì)胞發(fā)生收縮、凝聚，并最終通過吞噬作用被清除。這與壞死細(xì)胞死亡形成鮮明對比，壞死細(xì)胞死亡時細(xì)胞失控死亡并裂解，可產(chǎn)生免疫反應(yīng)異常激活等有害影響。因此，凋亡細(xì)胞以非常有序的方式死亡，可限制其對周圍細(xì)胞和組織的破壞。

多種方法可用于測定細(xì)胞死亡并區(qū)分其為凋亡還是壞死。NovoCyte 流式細(xì)胞儀具有自動補償設(shè)置和寬熒光檢測動態(tài)范圍，可輕松對檢測進(jìn)行定量，無需調(diào)整 PMT 電壓

免疫表型分析

免疫狀態(tài)與疾病狀態(tài)、治療效率以及對疫苗等外部刺激的反應(yīng)有關(guān)。免疫表型分析可快速識別候選細(xì)胞類型、亞類和功能。由于免疫細(xì)胞可能影響疫苗的免疫原性及其效能，因此監(jiān)測多種免疫細(xì)胞群的頻率以及特定細(xì)胞亞群（如單核細(xì)胞、NK 細(xì)胞、T 細(xì)胞和 B 細(xì)胞）的分化或活化狀態(tài)至關(guān)重要。NovoCyte 流式細(xì)胞儀可同時定量分析多種白細(xì)胞，以便更好地了解患者的免疫狀態(tài)并監(jiān)測機(jī)體對傳染病的免疫反應(yīng)。

細(xì)胞增殖

細(xì)胞增殖是一種重要功能，是高度結(jié)構(gòu)化的事件，如果不受控制，會導(dǎo)致疾病。我們可以通過絕對細(xì)胞計數(shù)或使用染料（例如 CFSE）測量增殖。當(dāng) CFSE 標(biāo)記的細(xì)胞發(fā)生分裂時，染料在子細(xì)胞之間平均分配，隨著染料的不斷稀釋，我們可以測量 CFSE 熒光隨時間的損失。此外，還繪制染料的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 與細(xì)胞濃度隨時間的變化曲線，以揭示兩者之間的反比關(guān)系。這類分析方法通常用于觀察 T 淋巴細(xì)胞活化的變化。

圖：使用 CFSE 測量 Jurkat T 細(xì)胞增殖。A) 使用 CFSE 標(biāo)記 Jurkat T 細(xì)胞，并通過 NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞隨時間的變化，以測定細(xì)胞分裂。每個峰值都對應(yīng)于一個單獨的時間點。B) 使用隨細(xì)胞分裂產(chǎn)生的信號稀釋，繪制絕對細(xì)胞計數(shù)與 CFSE 的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 隨時間的變化曲線。

細(xì)胞因子檢測

細(xì)胞因子是免疫細(xì)胞對病原體、自身免疫或治療藥物的激活反應(yīng)所必需的小分子。細(xì)胞因子的信號傳導(dǎo)可以調(diào)節(jié)基因調(diào)控、先天免疫反應(yīng)和適應(yīng)性免疫反應(yīng)以及炎癥。因此，測量細(xì)胞因子產(chǎn)生并確定細(xì)胞因子產(chǎn)生的來源對于深入了解免疫反應(yīng)非常重要。基于微球的流式細(xì)胞術(shù)檢測是測量細(xì)胞因子的高效方法，可以使用具有不同熒光強(qiáng)度的混合微球來測量單個樣品中的多種可溶性分析物。

細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)檢測

對細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的檢測和分析有助于細(xì)胞亞群和細(xì)胞過程的額外表征。為分析非細(xì)胞表面蛋白質(zhì)，需要進(jìn)行細(xì)胞固定和破膜。然而，許多磷酸特異性抗體與許多基于去垢劑的常用破膜方法（用于細(xì)胞內(nèi)染色）不兼容。在確定磷酸特異性抗體的適宜固定和破膜方法時，需要特別注意。最常見的方法是用 1.5% 多聚甲醛固定，然后用 100% 甲醇破膜。雖然這種方法適用于多種抗體，但請注意，并非每種磷酸特異性抗體都適用。

此外，在異質(zhì)性樣品中鑒定不同的細(xì)胞群，需要對表面蛋白連接的磷酸化蛋白進(jìn)行染色。必須特別考慮這些表位對固定劑的敏感性，并采取相應(yīng)預(yù)防措施，避免損害表位。因此，樣品在固定前可能需要對特定的表面標(biāo)記物進(jìn)行染色

細(xì)胞周期分析

正常的人體細(xì)胞是含有恒定數(shù)量 DNA 的二倍體。在細(xì)胞分裂的過程中，DNA 合成導(dǎo)致總 DNA 含量翻倍，隨后在有絲分裂后恢復(fù)正常的 DNA 含量。利用 NovoCyte 流式細(xì)胞儀，可以進(jìn)行詳細(xì)的細(xì)胞周期分析，了解腫瘤細(xì)胞分化、細(xì)胞轉(zhuǎn)化以及細(xì)胞與化合物之間的相互作用。

圖：在 10 µg/M MG132 或 500 µg/M 5-FU 處理 16 小時后，使用 ACEA NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析 A549 細(xì)胞的細(xì)胞周期分布。NovoExpress 內(nèi)置的細(xì)胞周期分析模塊中的圖像顯示了處于 G0/G1 期（綠色）、S 期（黃色）和 G2/M 期（藍(lán)色）的細(xì)胞。與正常未處理的細(xì)胞相比，MG132 處理的細(xì)胞停滯在 G2/M 期，而 5-FU 處理的細(xì)胞停滯在 G0/G1 期。